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组织保存液MJ104搭配净信悬液制备仪攻克脊髓损伤单细胞分析难题


  在做脊髓损伤模型的下游单细胞分析实验时,常常会出现取材时间与实验时间对不齐,脊髓组织离体后细胞迅速死亡、活率断崖式下跌等现象;特别是需要建立脊髓损伤动物模型饲养一段恢复期后再取材的实验,等把组织样本送到检测单位,组织已经在体外停留了好久,其活性已经下降。传统的制备方法没有对其的破局方法,后来我们选用了酶离MJ104高活性组织保存液与上海净信的单细胞悬液制备仪相搭配应用,有效解决了脊髓损伤单细胞分析的实验难题。

  

  实验背景


  本次实验模拟真实科研场景:小鼠建立脊髓损伤模型后经过饲养恢复期,处死取材后需要将脊髓组织浸入酶离者MJ104高活性组织保存液,低温条件下保存48h,随后转入上海净信的单细胞悬液制备仪完成组织解离,最终用于流式分选巨噬细胞。


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  1.酶离者MJ104组织保存液


  高活性组织保存液是酶离者针对离体组织长时间保存需求推出的专用保存液,含有维持细胞膜稳定性和代谢活性的多种成分,可在低温条件下延缓离体组织细胞死亡,为后续实验提供更充足的操作时间窗口。


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  在本次实验中,小鼠脊髓组织浸入MJ104保存液后静置48小时后组织仍保持良好的细胞活性,为后续高质量单细胞悬液制备打下了基础。高活性组织保存液MJ104的实验应用可有效延长操作时间窗口,维持细胞膜完整性,且适配多种组织类型 ,配方稳定,开箱即用。


  2.净信单细胞悬液制备仪


  上海净信单细胞悬液制备仪可将机械研磨解离与精准温控孵育整合为一体,内置多种组织专属程序(包括脊髓程序),无需人工频繁操作,即可实现从组织块到单细胞悬液的全自动闭管处理,精准控温解离,多种组织兼容,大幅减少人员差异对实验结果的影响。


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  单细胞悬液制备仪配合酶离者系列消化酶,可进一步提升解离效率与细胞活率,适用于脑、脊髓、肺、心脏、肌肉等多类难解离组织。


  实验操作步骤:


  1.取材与保存:小鼠断颈处死后,将脊髓组织立即放入酶离者MJ104组织保存液中,保后取出进行实验。

  

  2.仪器预热与连接:连接净信单细胞悬液制备仪电源,打开加热功能,选定脊髓程序备用,确保模块温度达到最佳解离状态。

  

  3.消化酶解冻:消化酶和终止液提前用流动自来水解冻,使其混合更加均匀,避免因局部浓度不均影响消化效果。

  

  4.组织预处理入管:取出脊髓组织,用 PBS 洗涤后,用眼科剪将组织剪碎,放入消化管中,加入约消化酶。

  

  5.仪器解离:将消化管放到单细胞悬液制备仪模块上,选择脊髓程序,点击运行。程序结束后仪器自动停止,全程无需人工守候。

  

  6.过滤与终止消化:用70μm滤网过滤解离液,按比例加入终止液终止消化,获得初步细胞悬液。

  

  7.裂红与碎片去除:离心弃上清后,加入裂红溶液,冰上裂红几分钟;随后加入PBS+碎片去除剂,离心弃上清,洗细胞,去除死细胞碎片干扰。

  

  8.重悬计数,准备分选:加入少量无菌 dPBS 打散底部沉淀,混匀即得单细胞悬液,进行染色与细胞计数,随后开展流式分选巨噬细胞。


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  推荐搭配方案核心方案


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  优势总结


  1. 酶离者MJ104 组织保存液可将离体组织安全保存 48 小时以上,解除取材与实验时间错位的困扰


  2. 净信制备仪内置脊髓专属程序,全自动闭管操作,消除人工操作差异


  3. 磁珠剪切与酶消化协同,有效提升脊髓等致密组织的解离效率与细胞活率


  4. 配套碎片去除剂进一步净化悬液,下游流式、测序等分析结果更可靠


  5. 全套方案覆盖保存→解离→纯化完整链路,适用于脊髓损伤等慢性模型科研需求

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